تولید ویروس کاذب نقص ایمنی اکتسابی انسان
پایان نامه
- نویسنده المیرا محمدی
- استاد راهنما ماندانا بهبهانی
- تعداد صفحات: ۱۵ صفحه ی اول
- سال انتشار 1391
چکیده
انتقال ژن خارجی به سلول ها با اهداف مختلف تحقیقاتی و درمانی و با بکارگیری سه روش فیزیکی، شیمیایی و زیستی صورت می گیرد. روش زیستی یا انتقال ژن با استفاده از ناقل های ویروسی یکی از پرکاربردترین روش های انتقال ژن در کارآزمایی هایی بالینی است. ناقل های لنتی ویروسی بر پایه جنس لنتی ویروس از خانواده رتروویریده تولید می شوند و ناقل های بر مبنای hiv-1 از پرکاربردترین این ناقل ها هستند. علت توجه به این ناقل ها توانایی آن ها برای تحویل ژن به سلول های تقسیم شونده و غیرتقسیم شونده و بیان طولانی مدت ژن خارجی در این سلول هاست که موجب استفاده گسترده این ناقل ها در شرایطin vitro و in vivo شده است. در این پژوهش یک ناقل لنتی ویروسی بر پایه hiv-1 با روش ترانسفکشن همزمان سه پلاسمید pwpxl (پلاسمید بیانی و حامل ژن gfp به عنوان گزارشگر) و pspax2 (حامل ژن هایgag و (pol و pmd2.g (حامل ژن vsv-g به عنوان پوشش ویروس کاذب) با استفاده از روش کلسیم فسفات روی رده سلولیhek293t، تولید شد. ناقل تولید شده توانایی تکثیر و تولید ذرات ویروسی جدید را پس از ترانسداکشن در نسل های بعد نداشته و ایمن است. کارایی ترانسفکشن با استفاده از فلوسیتومتری بررسی شد و میزان سلول های بیان کنندهgfp ، 37/51 گزارش شد. تغلیظ ویروس با استفاده از اولتراسانتریفوژ و پلی اتیلن گلیکول انجام و ترانسداکشن روی رده های سلولی vero و a549 صورت گرفت و پس از آن بیان gfp با میکروسکوپ فلورسانس بررسی و تایید شد. بررسی سلول های آلوده شده با ویروس کاذب، 15 روز پس از ترانسداکشن با استفاده از میکروسکوپ فلورسانس و همچنین تکنیک فلوسیتومتری نشان دهنده بیان مداوم gfp بوده بعلاوه ویروس کاذب تولید شده تاثیر مخرب بر چرخه سلولی نداشته است. در این پژوهش ویروس کاذب hiv-1 (یک ناقل لنتی ویروسی) تولید شد. این ناقل ایمن بوده و با توجه به توانایی آن در آلوده کردن هر دو نوع سلول های غیر تقسیم شونده و سلول های در حال تقسیم، ابزاری سودمند جهت کاربردهای انتقال ژن می باشد.
منابع مشابه
راه‌اندازی روش RT-Nested PCR به منظور تشخیص ویروس نقص ایمنی اکتسابی تیپ یک
چکید ه سابقه و هدف ویروس نقص ایمنی اکتسابی تیپ یک( HIV-1 ) عامل ایجاد کننده سندرم نقص ایمنی اکتسابی انسانی”ایدز” می‌باشد. انتقال بیماری از طریق انتقال خون در دوره پنجره، در مراکز انتقال خون یک معضل جهانی محسوب می‌شود. علاوه بر این، نیاز مبرمی برای تشخیص سریع، حساس و دقیق عفونت HIV-1 قبل از ظهور آنتی‌بادی در بدن فرد آلوده در بیمارستان‌ها و مراکز بهداشتی احساس می‌شود. تشخیص ژنوم ویروس HIV-1...
متن کاملفراوانی عفونت ویروس اپشتین بار در افراد آلوده به ویروس نقص ایمنی انسان
زمینه و هدف : یکی از عفونت های فرصت طلب در بیماران مبتلا به ویروس نقص ایمنی انسانی، ویروس اپشتین بار می‌باشد که منجر به عوارض شدیدی در این بیماران می‌شود. هدف این مطالعه بررسی فراوانی ویروس اپشتین بار در بیماران مبتلا به ویروس نقص ایمنی انسان و مقایسه آن با جمعیت غیرمبتلا و ارتباط آن با تعداد لنفوسیت‌های CD4+ بود. روش بررسی: در این مطالعه مورد ـ شاهدی آینده‌نگر دو گروه 114 نفری همسان(از ل...
متن کامللیشمانیوز منتشر پوستی در یک بیمار مبتلا به عفونت با ویروس نقص ایمنی اکتسابی (ایدز): گزارش موردی
Leishmaniasis is a group of diseases which is caused by an intracellular protozoal infection. It is the third most common opportunistic infectious disease in HIV positive patients worldwide. In this article, we present a 30-year-old women who was a known case of HIV/AIDS infection and developed multiple papules and nodules as on her face, arm and shoulder with diagnoses of diffuse cutaneous lei...
متن کاملفراوانی عفونت ناشی از ویروس نقص ایمنی انسان (HIV) میان معتادین تزریقی شیراز
معتادین مواد مخدر، به ویژه نوع تزریقی، از جمله گروه های پرخطر از نظر ابتلا به عفونت ناشی از ویروس نقص ایمنی انسان (HIV) هستند. علت اصلی این مشکل، استفاده مشترک ازسرنگ آلوده برای تزریق مواد مخدر می باشد. به همین منظور این مطالعه را با هدف تعیین شیوع عفونت ناشی از HIV به اجرا در آوریم. تحقیق حاضر در 1061 نفر از معتادان که به صورت تصادفی انتخاب شده بودند، در اردوگاه بازپروری پیربنو شیراز در سال 13...
متن کاملنشانگان افت روحیه در بیماران مبتلا به ویروس نقص ایمنی انسان
زمینه و هدف نشانگان افت روحیه، باعث ناتوانی فرد برای مقابله مؤثر با یک رویداد پرفشار می شود و به دنبال آن فقدان احساس تسلط بر امور و معنای زندگی می تواند در فرد احساس بی کفایتی ذهنی ایجاد کند که ممکن است مبتلایان به بیماری های بالقوه مهلک، آن را تجربه کنند. هدف پژوهش حاضر مقایسه نشانگان افت روحیه بیماران مبتلا به ویروس نقص ایمنی انسان با جمعیت عادی بود. مواد و روش ها در مطالعه توصیفی- مقایسه ...
متن کاملطراحی و ساخت وکتور نوترکیب واجد ژن Vpr ویروس نقص ایمنی اکتسابی انسانی (HIV) با استفاده از وکتور EGFP-N1
Background and purpose: The purpose of this study was to design a recombinant vector pEFGP- N1 containing the full length of HIV-1Vpr gene. To the best of our knowledge, the cloning of Vpr gene in pEGFP_N1 is not previously done. Materials and methods: As a source of Vpr gene the pUC19-Vpr recombinant vector was confirmed by digestion with restriction enzymes BglII and NotI in order to separ...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023